革兰染色的步骤（革兰氏染色步骤是什么）

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 1、涂片固定。 2、草酸铵结晶紫染1分钟。 3、蒸馏水冲洗。 4、加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5、水洗，用吸水纸吸去水分。 6、...，以下是对"革兰染色的步骤"的详细解答!

文章目录

• 1、革兰氏染色步骤是什么
• 2、革兰氏的染色步骤
• 3、革兰氏染色的步骤和原理
• 4、革兰染色步骤正确顺序是什么

革兰氏染色步骤是什么

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：

1、涂片固定。

2、草酸铵结晶紫染1分钟。

3、蒸馏水冲洗。

4、加碘液覆盖涂面染约1分钟。

5、水洗，用吸水纸吸去水分。

6、加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。

7、蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸馏水冲洗。干燥，镜检。

原理

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙；

因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

革兰氏的染色步骤

革兰氏染色法具体操作步骤：

涂片固定。

草酸铵结晶紫染1分钟。

纯化水冲洗。

加碘液覆盖涂面染1分钟。

水洗，用吸水纸吸去水分。

加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。

番红染色液（稀）染10秒钟后，纯化水冲洗。干燥，镜检。

基本原理：革兰氏染色反应是***分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到***的形态而且还可将所有***区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性***，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性***，用G-表示。***对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。

器材：大肠杆菌，金黄色葡萄球菌；草酸铵结晶紫，番红水溶液，碘液，95%乙醇，载玻片，显微镜等。

革兰氏染色的步骤和原理

革兰氏染色的步骤和原理如下:

步骤:

1、首先在载玻片上滴一小滴蒸馏水，用灼***过的接种针挑取少量***，置载玻片的水滴中与水混合并涂抹开，注意涂抹要均匀平坦，涂抹后直径约为1 cm的薄层。

2、固定。将载玻片在火焰上方固定。

3、染色。加路哥式碘液大概一滴，作用1 min后用水冲洗，注意流水不要直接往薄层上冲，用过滤纸吸干。

4、脱色。用95%乙醇脱色，一般脱色时间大概为30 s。

5、观察。

干燥后，用油镜镜检观察，并做好记录。

原理：染色后***与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到***的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。

革兰染色在医学上的重要意义:

1、鉴别***：用革兰染色法可将所有***分成革兰阳性菌及革兰阴性菌两大类，便于初步识别***。

2、选择***：临床上可很据病原菌的革兰染色性，选择有效的***用于***。

3、与致病性有关：有些革兰阳性菌能产生外毒素，而革兰阴性菌则主要具有内毒素，两者致病作用不同。

革兰染色步骤正确顺序是什么

革兰染色的正确顺序是结晶紫、碘液、95%乙醇、稀释复红。

在结晶紫初染和碘液媒染之后，在这个细胞壁里面，细胞壁里面产生了复合物，这个时候由于细胞壁是非常厚的，而且肽聚糖网层又多又密，在遇到乙醇脱色处理的时候，网孔变小了。

这个时候乙醇处理就没有缝隙出现，这个时候相关的复合物，在细胞壁里面就会牢牢的停留住，不过这个时候仍然会呈现紫色，后面遇到脱色剂了之后有复合物溶出，虽然已经过了驼色的处理但是仍然是没有颜色，后面再经过红色染料复染，革兰氏阴性菌就变成了红色。